RiboNAT™ Rapid Sterility Test - RNA Isolation Kit 1
RiboNAT™ Rapid Sterility Test - RNA Isolation Kit 1
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製品コード
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容量
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価格
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在庫 / 納期目安
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50回用
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ドキュメント
キットコンポーネント
50 Tests
| Proteinase K Solution | 700 μL ×1 |
|---|---|
| Enzyme Mix | 750 μL ×1 |
| DNase Solution | 380 μL ×1 |
| 1st-DNase Buffer (1) | 23 mL ×1 |
| 2nd-DNase Buffer (2) | 180 μL ×1 |
| Activator Solution 1 (SCDM) | 50 mL ×1 |
| Activator Solution 2 (TG) | 50 mL ×2 |
| Enzyme Enhancer | 50 mL ×1 |
| Nucleic Acid Inactivator | 60 μL ×1 |
製品概要
医薬品の安全性試験の一環として、微生物汚染を確認するための無菌試験が実施されます。薬局方に定められた無菌試験法では14日間の培養が必要とされることから、使用期限の短い細胞医薬品などを中心に、より迅速な試験法の必要性が高まっています。RiboNAT™は、NAT法（Nucleic Acid Amplification Test）により、迅速に細菌および真菌を検出することができます。
特長
- 短時間（7時間）かつ高感度（9 CFU/ｍL）
- 微生物のTotal RNAを抽出し、Ribosomal RNAを検出
- 1 assayで細菌、真菌を広範囲に検出可能（定性試験）
- 検体中の残存DNAに由来する偽陽性を低減
アッセイフロー
- Step 1. Pre-treatment
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- 微生物の活性化
- 残留DNAの不活化
3.5 時間- RNA Isolation Kit 1
- Step 2. RNA isolation
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- 微生物の溶解
- RNA抽出・精製（磁気ビーズ）
1.5 時間- RNA Isolation Kit 1
- RNA Isolation Kit 2
- Detection Kit
- Step 3. Measurement
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- 逆転写リアルタイム
PCRによるRNA検出
1.2 時間- RNA Isolation Kit 1
- Detection Kit
- 逆転写リアルタイム
※BioRenderのイラストを使用しています
時
間
※アッセイにはRiboNAT RNA Isolation Kit 1, RNA Isolation Kit 2, Detection Kit 全てが必要です。
検出キットの仕様
| 原理 | 蛍光プローブによるOne step逆転写リアルタイムPCR法 |
|---|---|
| 検出限界 | 100 RNAコピー/ reaction |
| プライマー/プローブ配列のカバー率* | 細菌: 25,748種（95.7 %） 真菌: 1,683種（92.3 %） *In silico解析、3ミスマッチ許容、使用データバンク: Silva |
| 標的配列 | 細菌：23S Ribosomal RNA（検出波長：515-530 nm） 真菌：25/28S Ribosomal RNA（検出波長:675-690 nm） Internal Control：合成配列（検出波長:560-580 nm） |
試験性能
薬局方掲載 6 菌種の検出 ：各 9CFU/mLを添加
9 CFU/mL 検出可能
薬局方掲載 6 菌種の検出 ：各 9CFU/mLを添加（細胞存在下）
添加細胞：HEK293
細胞量：0.25 x 106 cells/mL
（0.5 x 106 cells /2 mL /assay）
※下記条件でも同様の結果を確認
- 間葉系幹細胞 (MSC)：0.5 x 106 cells/mL
- T-cell：1.0 x 106 cells/mL
細胞存在下でも 9 CFU/mL 検出可能
より高感度な測定法
- 菌濃度：2 CFU/mL
- インキュベーション時間：3～15時間
Aspergillus brasiliensis
BIOBALL®
菌株：NCPF2275
＜真菌＞
Clostridium sporogenes
BIOBALL®
菌株：NCTC12935
＜偏性嫌気性菌＞
Cutibacterium Acnes
BIOBALL®
菌株：DSM1897
＜通性嫌気性菌, Doubling time：5h＞
14時間以上のインキュベーションで、偏性嫌気性菌や増殖が遅い菌も2 CFU/mLを検出できました。
インキュベーション時間を延ばすことで、より高感度化が可能
偽陽性の低減
RiboNAT™には、死菌DNA不活化試薬および、DNaseによる処理工程が含まれます。これにより検体中の残留DNAによる偽陽性を低減することができます。
残留DNAに起因する偽陽性を低減
操作法動画
FAQ
- 試験に必要な検体量は？
- 標準プロトコルでは、検体2mLを遠心分離して試験に用います。より少量の検体でも試験可能ですが、検出能は低下します。
- 1キットで何検体測定できるか？
- 測定ごとにコントロールが必要なため、測定回数により異なります。1検体あたり、RNA抽出を1回、1抽出液からPCRを2well（n=2）で実施します。
検体の他に、測定ごとにNegative Extraction Control（抽出１回→PCR 2well）、No-Template Control（PCR 4 well）、PCR Positive Control（PCR 4 well）が必要です。RNA Isolation Kitは50回抽出分、Detection KitはPCR 100well分の容量です。
- 試薬は一度に使い切らなくても大丈夫か？
- 大丈夫です。使用後、適切な温度で保管し、使用期限までにお使いください。
- 使用できるリアルタイムPCR装置は？
- CFX96 System（Bio-Rad Laboratories, Inc.）、Quant Studio® 5 Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific Inc.）で検証済みです。これらの機種以外でも、指定波長を検出できる装置であれば使用可能です。
概要・使用例
| 概要 | 本品は医薬品の迅速無菌試験に使用する試薬キットです（試験研究用）。 RiboNAT Rapid Sterility Test - RNA Isolation Kit 1、RNA Isolation Kit 2、Detection Kitの3製品をセットで使用します。 rRNAをターゲットとしたワンステップ・リアルタイムRT-PCR法で、約7時間で結果が得られます。 |
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物性情報
「物性情報」は参考情報でございます。規格値を除き、この製品の性能を保証するものではございません。
本製品の品質及び性能については、本品の製品規格書をご確認ください。
なお目的のご研究に対しましては、予備検討を行う事をお勧めします。
製造元情報
別名一覧
- 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
- 製品規格・包装規格の改訂が行われた場合、画像と実際の製品の仕様が異なる場合があります。
- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
- 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
- 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。