試験管内進化法による抗体の親和性向上
RePHAGENではお手持ちの抗体 (scFV, Fab, VHH, VNAR) の親和性・特異性・安定性を向上させるための基盤技術を有し、お客様のニーズに合わせた抗体に性能をカスタマイズします。
★独自戦略で結合親和性を大幅向上 ★他社取得の抗体にも対応
RePHAGENの強み
『既存抗体の
性能向上』
・2種の抗体提示システム (ファージ、出芽酵母) を活用
スクリーニング工程において、お客様の目的に応じて2つの抗体提示システムを使い分けています。
1つ目は、VHH抗体の単離でも実績豊富なファージディスプレイ法です。多様性の高いライブラリーから迅速かつ堅実に対象バインダーをスクリーニングします。
2つ目は、出芽酵母を用いた酵母ディスプレイ法です。セルソーター (FACS) と組み合わせることで、抗体の結合親和性のわずかな違いを高精度に選別し、親和性が大幅に向上したクローンを効率よく濃縮・回収できます。
お客様の要求スペックに合わせた最適手法をご提案します。
ご依頼の流れ
- STEP 01
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事前相談
試験管内進化 (親和性向上・特異性改変・安定性向上など) を希望される親抗体に関する基本情報 (配列・構造等) や、目標とする達成基準 (親和性の向上倍率など) をご提示いただきます。 情報をご提供いただく前に秘密保持契約 (NDA) の締結が可能ですので、事前相談時にお気軽にお申し付けください。ご提示いただいた情報を分析し、最適な作業工程 (変異導入戦略等) を作成した上で御見積を算定いたします。
- STEP 02
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契約
業務委託契約、共同研究契約など、委受託内容とご希望に合わせた最適な契約形態をご選択いただきます。 VHH抗体取得サービスと組み合わせて試験管内進化を行う場合は、「取引基本契約＋都度発注書」による、発注時の都度契約手続きを簡素化・スピード化する運用も選択いただけます。
- STEP 03
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標的抗原および親抗体の入手
お客様より指定の標的抗原、および進化のベースとなる親抗体の遺伝子 (またはプラスミド等) をご提供いただきます。 ※必要に応じて、 RePHAGEN側で抗体遺伝子合成・抗原作製も承ります。
- STEP 04
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ライブラリー構築
ファージライブラリー (1×108～10規模) または酵母ディスプレイライブラリー (1×106～8規模) を作製します。構築したライブラリーの品質 (多様性) は、一部をシーケンス解析することで確認します。
- STEP 05
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スクリーニング
ライブラリーから標的抗原に対するスクリーニングを行い、親抗体よりも性能が向上したクローンを効率的に濃縮します。複数回の選択ラウンドを経て単クローン化します。
- STEP 06
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取得抗体遺伝子の解析
性能が向上したクローンの遺伝子配列をサンガー法により解析いたします。この解析情報を元に、最大3クローンまでご選択いただきます。
- STEP 07
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抗体タンパク質の作製
ご選択いただいた抗体遺伝子を発現ベクターに組み込み、発現・精製を行います。精製した変異抗体はSDS-PAGEおよびELISAで品質・機能を評価します。
- STEP 08
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抗体および試験報告書の納品
以下の成果物を納品いたします。
・精製抗体タンパク質：抗体1クローン当たり0.1 mg 〜 1 mg程度を納品いたします。
抗体の保存に最適な「冷蔵品扱い」で安全に配送いたします。
・試験報告書：スクリーニング結果、取得したVHH抗体の塩基配列・アミノ酸配列の解析データ等。
価格・納期
- 抗原入手より、概ね6ヶ月
- 価格につきましては個別にお見積りいたします。
事前相談の他、より詳細な技術紹介も無料で承っております。まずはお気軽にご相談ください。
お見積り・ご注文について
【本サイト掲載情報について】
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- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
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