抗体関連サービス: モノクローナル抗体作製

VHH抗体作製受託サービス

RePHAGEN株式会社

RePHAGENでは独自戦略で多様性を増幅させた、非免疫アルパカ由来のVHH抗体ライブラリーを構築し、高品質なVHH抗体を短期間・低コストでご提供します。

★動物免疫不要・短納期 (3ヶ月) ★必要な抗原量は100 mg ★納品抗体の権利は基本的に委託者側に帰属

RePHAGENの強み

『免疫不要で
簡便迅速な
VHH抗体取得』

・独自戦略で多様性を増大させた独自ライブラリー

Tsukahara, N. et al. An alpaca single-domain antibody (VHH) phage display library constructed by CDR shuffling provided high-affinity VHHs against desired protein antigens. International Immunology 34, 421–434 (2022)
doi: 10.1093/intimm/dxac022.

11匹のアルパカから回収した合計1.1x108種のcDNAをベースに、抗体遺伝子の前半部と後半部を独立して増幅。これらをランダムに再結合させることで、理論上1.1x1016という多様性を有するVHH抗体遺伝子ライブラリーを構築しました。この豊富な遺伝子ソースを活用し、実際のスクリーニング用として4 x1010の多様性を誇るVHH抗体提示ファージライブラリーを作製しました。この膨大な多様性により、目的抗体の高確率・迅速な取得はもちろん、特定エピトープを狙い撃つ抗体や、動物免疫では獲得が困難な抗原抗体複合体等を認識する抗体まで、幅広い難易度の抗原に対応できる点が強みです。

ご依頼の流れ

STEP 01

事前相談

抗原情報やご希望の仕様などの基礎情報をご提示いただきます。
情報をご提供いただく前に秘密保持契約 (NDA) の締結が可能ですので、事前相談時にお気軽にお申し付けください。
ご提示いただいた情報 (抗原の分子量、アミノ酸配列、高次構造など) を分析し、抗体取得の難易度を査定した上で御見積を算定いたします。

STEP 02

契約

業務委託契約、共同研究契約など、委受託内容とご希望に合わせた最適な契約形態をご選択いただきます。取得抗体の特許権等の知的財産権につきましては、基本的に委託者様に帰属します。また、複数回のご依頼を予定されている場合は「取引基本契約+都度発注書」による、発注ごとの契約手続きを簡素化・スピード化する運用も選択いただけます。

STEP 03

標的抗原の入手・調製

お客様より指定の抗原をご提供いただきます。必要な抗原量は、特殊な形状・性質の場合を除き、概ね100 μgご用意いただければ十分です。 ※必要に応じて、RePHAGEN側での抗原作製・調製も承ります (別途費用)。

STEP 04

スクリーニング

標的抗原に対して、4×1010規模のVHH抗体提示ファージライブラリーを用いてバイオパニングを行い、結合性を有するクローンの濃縮を行います。
2〜3ラウンドのパニングを実施後に単クローン化し、ELISA法にて結合性評価試験を行います。

STEP 05

取得抗体遺伝子の解析

結合性評価試験で陽性となったVHH抗体遺伝子について、サンガー法による配列解析を行います。 この解析情報を元に、ご希望のクローンを1抗原当たり最大3クローンまでご選択いただきます。(結合性試験が陽性かつ配列が独立したクローンが3クローンに満たない場合は、取得できた全数となります)

STEP 06

リコンビナントVHH抗体タンパク質の作製

ご選択いただいたクローン (1抗原につき最大3クローン) を大腸菌発現ベクターに組換え、大腸菌への形質転換、培養、およびHis-Tag精製を行います。精製した抗体はSDS-PAGEおよびELISAで確認します。

STEP 07

抗体および試験報告書の納品

以下の成果物を納品いたします。
精製抗体タンパク質:抗体1クローン当たり0.1 mg 〜 1 mg程度を納品いたします。
VHH抗体の保存に最適な「冷蔵品扱い」で安全に配送いたします。
詳細試験報告書:スクリーニング結果、取得したVHH抗体の塩基配列・アミノ酸配列の解析データ等。

価格・納期

  • ご注文および抗原受領より、約3ヶ月 (進捗次第で早期納品いたします)
  • 価格につきましては個別にお見積りいたします。

難易度の高い抗原や取得可能性の事前相談の他、より詳細な技術紹介も無料で承っております。まずはお気軽にご相談ください。

お見積り・ご注文について

ご依頼方法

下記のお見積り・ご注文フォームに必要事項をご記入の上ご連絡ください。

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