マスサイトメーター（Helios）によるマルチパラメータータンパクの解析
1細胞由来のタンパク質発現を抗体と安定同位体標識された金属元素を組み合わせ30マーカー以上を同時解析します。
特長
・細胞を1細胞レベルで高速に解析をするフローサイトメトリーと、元素の質量に基づいて物質を高次元、高分解能で解析できるICP-TOF-MSを融合した
『マスサイトメトリー』の技術を応用しています。
・マスサイトメーターによるタンパクの検出は、目的タンパクに特異的に結合する抗体をプローブに用い、この抗体には金属元素の安定同位体が標識されています。
・金属元素の安定同位体による検出は質量を用いるため、各々の同位体に固有の離散値で、シャープなピークとして検出される。
このため30種類以上のパラメーターを超える抗体を同時に測定する場合であっても『コンペンセーション』が不要です。
測定原理
・純度99.999％のアルゴンガスを6000℃で燃焼することにより誘導結合プラズマ（ICP）を発生させます
・金属で標識した細胞をICPにより燃焼し、1細胞単位でイオン化します
・4重極型イオントラップでクリーニングし、TOF-Massにより質量解析を行います
・FCSファイルより専用ソフトを用いてデータを解析
■新たな免疫細胞プロファイリング専用キット
The Maxpar Direct Immune Profiling Assay（DIPA）
・ヒトPBMCおよび全血の免疫プロファイリングのために開発
・凍結乾燥により30種類の標識抗体を容器に固定
・37種類のポピュレーションを同時解析
・専用解析ソフトウェアによる信頼性の高いデータを提供
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■ターゲットポピュレーション
Population Monocytes classical transitional nonclassical Dendritic cells myeloid plasmacytoid Granulocytes neutrophils CD66b- neutrophils basophils eosinophils Lymphocytes NK early late B cells naïve memory plasmablasts CD3＋ Tcell γδ MAIT/NKT CD3+/CD4+ naïve central memory effector memory terminal effector Th1 Th2 Th17 T regulatory cell CD3+/CD8+ naïve central memory effector memory terminal effector -
■マーカー一覧
抗体種類(30種類) Antibody Clone Mass CD45 HI30 89Y CD196/CCR6 G034E3 141Pi CD123 6H6 143Nd CD19 HIB19 144Nd CD4 RPA-T4 145Nd CD8 RPA-T8 146Nd CD11c Bu15 147Sm CD16 3G8 148Nd CD45RO UCHL1 149Sm CD45RA HI100 150Nd CD161 HP-3G10 151Eu CD194/CCR4 L291H4 152Sm CD25 BC96 153Eu CD27 O323 154Sm CD57 HCD57 155Gd CD183/CXCR3 G025H7 156Gd CD185/CXCR5 J252D4 158Gd CD28 CD28.2 160Gd CD38 HB-7 161Dy CD56/NCAM NCAM16.2 163Dy TCRgd B1 164Dy CD294 BM16 166Er CD197/CCR7 G043H7 167Er CD14 63D3 168Er CD3 UCHT1 170Er CD20 2H7 171Yb CD66b G10F5 172Yb HLA-DR LN3 173Yb IgD IA6-2 174Yb CD127 A019D5 176Yb Live/Dead Intercalator-103Rh 103Rh
DIPAのFCSファイルを解析する専用ソフトウェアによる解析
Maxpar Pathsetter Softwareによる データ解析
37種類の免疫細胞サブセットを全自動で解析をすることで、解析者によるデータのバラつきを回避し、包括的な免疫表現型の解析が可能
多種類のレポートの出力が可能なため、PDFやExcelでのエクスポートも可能
サービス内容
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