長瀬産業 DMSOフリー細胞凍結保存液
本製品は細胞への負担が少ない処方設計のDMSOフリー細胞凍結保存液です。
高い細胞保存性能を持ち、良好な泡切れが特長です。
DMSOフリー/Animal Origin フリー/ケミカリーディファインド/タンパクフリー
製品概要
特長
- 高い細胞保存性能
- 細胞への負担が少ない処方設計
- 良好な泡切れ
プロトコル例
緩慢凍結プロトコル
- 細胞の汚染や状態を確認後、試験管などに収集
- 細胞数や生存率を確認
- 遠心分離を行い、上清をアスピレーターにて除去
- 5×105〜1×107個程度の細胞 / mLとなるよう細胞凍結保存液を加えて軽くピペッティング
- 細胞懸濁液をクライオチューブに分注
- -80℃のディープフリーザーで凍結保存
※長時間保存する場合は液体窒素タンクで保存
融解プロトコル
- 凍結細胞を37℃で速やかに融解
- 直ちに5 - 10倍量程度の培養用培地と混和
- 遠心分離を行い、上清をアスピレーターにて除去
- 適量の培地で懸濁し、培養用容器へ移す
- 常法にて細胞培養
アプリケーションデータ
高い細胞凍結保存性能
1. 通常細胞の場合
NAGASE‘s Cryopreservation Solution-1 および従来の保存液 (10%-DMSO含有) を用いてヒト脂肪由来間葉系幹細胞 (AT-MSC) を凍結保存後 (-80℃で1週間)、培養した。本品はDMSOフリーであるにもかかわらず、本系ではDMSO含有保存液に劣らない起眠直後の細胞生存性 (図1：NCS-1) と経時的な増殖性を示した (図2：NCS-1)。
2. 過継代した細胞の場合
本品および従来の保存液 (10% - DMSO含有あるいは不含) を用いて正常ヒト繊維芽細胞 (NHDF) を過継代して凍結保存後 (-80℃で4ヵ月)、細胞数を算出した。本品はDMSOフリーであるにもかかわらず、本系ではDMSO含有保存液に劣らない結果が確認できた (図3：NCS-1)。また、一般的なDMSO不含保存液では細胞状態や保存期間によって保存性能がばらつく可能性が示唆された。
細胞に対して低ストレス
本品および従来の保存液 (10% - DMSO含有あるいは不含) を用いてヒト骨髄由来間葉系幹細胞 (BM-MSC) を継代して凍結保存後 (-80℃で2週間)、細胞生存率を算出した。本品はDMSOフリーであるにもかかわらず、本系ではDMSO含有保存液に劣らない保存性能を示した (図4：NCS-1)。 さらに、同条件で処理した被検群を融解してそのまま室温で3時間静置後に細胞生存率を算出した。本品は他のDMSO含有および不含保存液と異なり生存率の低下がほぼないことが確認された (図4：NCS-1)。保存液への長時間暴露において低ストレスであることがうかがわれた。
製品一覧
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細胞凍結保存液
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