ウイルス粒子やヘパリン結合タンパク質の精製に
JNC セルファイン™ MAX DexS-HbP/DexS-VirS
セルファイン™ MAX DexS シリーズは真球状のセルロース粒子に硫酸デキストランポリマーを固定化したアフィニティクロマトグラフィー用充填剤です。
リガンドはヘパリンと類似した構造を有しており、ヘパリンと同等のアフィニティ活性を示しますが、動物由来原料を使用していないため安全性の高い充填剤です。本シリーズではヘパリン結合タンパク質の精製に最適な「セルファイン™ MAX DexS-HbP」、およびウイルスやウイルス様粒子（VLP）の精製に最適な「セルファイン™ MAX DexS-VirS」をラインアップしています。
| 品名 | セルファイン™ MAX DexS-HbP | セルファイン™ MAX DexS-VirS |
|---|---|---|
| リガンド | デキストラン硫酸エステル基 | |
| マトリックス | 真球状高架橋セルロース | |
| 平均粒子径 | 90μm | |
| 吸着量 (リゾチーム) |
≥ 50 mg/ml | ≥ 56 mg/ml |
| 操作圧 | ＜0.3MPa | |
| pH安定性 | 3-12 | |
| 保存液 | 0.1M リン酸Na緩衝液、20% EtOH | |
特長
- 【DexS-HbP】
- ・ヘパリン結合タンパク質の精製に最適ラクトフェリンやアンチトロンビンⅢなどに対し優れたアフィニティ活性
- 【DexS-VirS】
- ・ウイルスやウイルス様粒子（VLP）の精製に最適鶏卵由来、細胞由来問わず精製可能
セルファイン™ MAX DexS-HbPのラクトフェリン吸着性能
セルファイン™ MAX DexS-VirS を用いたインフルエンザウイルスの精製例
セルファイン™ MAX DexS-VirSは鶏卵由来、細胞由来問わず、インフルエンザウイルス粒子を効率的に精製することができます。
【分析条件】
- サンプル
- ：鶏卵由来の漿尿膜液（不活化インフルエンザウイルスを含む）
- ウイルス株
- ：A/duck/Hokkaido/Vac-2/2007(H7N7)
- カラム
- ：5.0mm ID × 25mm H (0.5 mL)
- 平衡化バッファー
- ：10 mM リン酸Na, 120 mM NaCl, pH 7.4
- 洗浄バッファー
- ：10 mM リン酸Na150 mM NaCl, pH 7.4
- 溶出バッファー 1
- ：10 mM リン酸Na, 500 mM NaCl, pH 7.4
- 溶出バッファー 2
- ：10 mM リン酸Na, 2 M NaCl, pH 7.4
- 流速
- ：0.2 ml/min(60 cm/hr, R.T. 2.5 min)
● 培養液を直接ロード可能
● 2段階の溶出で90%のHAU回収率
| 工程 | HA活性 | 総タンパク質量 | DNA | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| HAU | % | mg | % | ng/HAU | mg | % | pg/HAU | |
| サンプルロード | 204,800 | 100 | 6.4 | 100 | 31.3 | 24.7 | 100 | 120.6 |
| フロースルーフラクション | 7,760 | 3.8 | 4.1 | 64.2 | 530.7 | － | － | － |
| 溶出フラクション 1 | 139,520 | 68.1 | 0.4 | 5.9 | 2.7 | 3.0 | 12.0 | 21.3 |
| 溶出フラクション 2 | 64,160 | 31.3 | 0.1 | 1.5 | 1.5 | 3.4 | 13.9 | 53 |
| 回収率 | 211,440 | 103.2 | 4.6 | 71.6 | 21.7 | － | － | － |
Recovery of Inactivated Influenza Flu Viral particles with Cellufine MAX DexS-VirS
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