遺伝子導入試薬
同仁化学 HilyMax
特長
- 多岐にわたる細胞へDNAを高効率に導入
- 血清を含む培地での導入が可能
- 導入遺伝子の細胞内シグナル応答が良好
- コストパフォーマンスに優れた純国産導入試薬
- ワンチューブによるシンプルプロトコール
- 遺伝子導入前の培地交換が不要
キット内容
| キット構成 | 容量 |
|---|---|
| HilyMax Reagent | 1 tube |
| lipoform Buffer | 1.0 ml×1 |
- HilyMAX Reagentの性状が透明～白色結晶であり、内容物が微量のため確認がしづらい場合がございます。
下記の写真は、アシストチューブの底を撮ったもので、中央付近の白い部分が現物となります。
使用法
はじめに
Lipoform BufferをHilyMax Reagent に加えてリポソーム溶液を調製します。
保存法
- リポソーム溶液を調製後は、-20 ℃で保存してください。6 ヶ月間安定です。
- リポソーム溶液を頻繁に使用する際は、0 ～ 5 ℃保存も可能です(1 ヶ月間安定)。
- 凍結したリポソーム溶液を融解後は、必ずボルテックス又はピペッティングにより、良く混合してご使用下さい。
- リポソーム溶液は、20回の凍結融解を繰り返しても、導入能に変化がないことを確認しております。
- 凍結融解の繰り返しを避けたい場合は、滅菌済みチューブへリポソーム溶液を小分けして、ご使用ください。
導入実績のある細胞種
細胞種ごとの導入条件・使用論文は下記リンク(メーカーHP)をご参照ください。
| 細胞名 | 由来種 | 組織 |
|---|---|---|
| 293 | ヒト | 腎臓 |
| 293T | ヒト | 胎児腎臓 |
| 3T3-L1 | マウス | 胚 |
| A172 | ヒト | グリア芽腫 |
| A549 | ヒト | 肺上皮がん |
| AGS | ヒト | 胃上皮 |
| ASPC1 | ヒト | 膵臓 |
| BmN | カイコ | カイコ 卵巣 |
| C2C12 | マウス | 骨芽 |
| Caco2 | ヒト | 腸管上皮 |
| CEF | ニワトリ | 胚 |
| CHO | チャイニーズハムスター | 卵巣 |
| CHO-S | チャイニーズハムスター | 卵巣(卵巣) |
| COS1 | アフリカミドリザル | 腎臓 |
| COS7 | アフリカミドリザル | 腎臓 |
| COV | ニワトリ | 卵巣 |
| DT40 | ニワトリ | 血球・リンパ系 |
| DU145 | ヒト | 前立腺がん細胞 |
| ECPC4 | マウス | 脳脈絡叢がん |
| END-D | マウス | 血管内皮 |
| H1395 | ヒト | 肺がん |
| HaCaT | ヒト | 皮膚角化細胞 |
| HC | ヒト | 胎児肝臓 |
| 細胞名 | 由来種 | 組織 |
|---|---|---|
| HEK293 | ヒト | 胎児腎臓 |
| HEK293FT | ヒト | 胎児腎細胞 |
| HEK293 T | ヒト | 胎児腎細胞 |
| HeLa | ヒト | 子宮頸がん |
| HeLaS3 | ヒト | 子宮頸がん |
| HepG2 | ヒト | 肝臓胆嚢 |
| HFL-1 | ヒト | 胎児肺 |
| HHSteC | ヒト | 肝星細胞 |
| HT29 | ヒト | 結腸がん |
| Human hepatic Stellate | ヒト | 肝臓 |
| JHH-4 | ヒト | 肝臓、胆嚢がん |
| Jurkat | ヒト | 白血病性T細胞 |
| K562 | ヒト | 血球・リンパ球 |
| KINGS1 | ヒト | グリア細胞 |
| L | マウス | 線維芽 |
| L6 | ラット | 筋組織 |
| L929 | ラット | 線維芽 |
| LMHI | ニワトリ | 肝臓がん |
| LNCap | ヒト | 前立腺がん |
| MC3T3-E1 | マウス | 骨芽細胞 |
| MCAS | ヒト | 卵巣がん |
| MCF7 | ヒト | 乳がん |
| MDCK | イヌ | 腎臓 |
| 細胞名 | 由来種 | 組織 |
|---|---|---|
| Mesenchymal cell | ヒト | 間葉系 |
| MEF | マウス | 胎児由来線維芽細胞 |
| MG63 | ヒト | 骨肉腫 |
| MKN | ヒト | 胃 |
| NB1 | ヒト | 神経芽細胞腫 |
| Neuro2a | マウス | 神経系 |
| NIH3T3 | マウス | 胎仔 |
| PA-1 | ヒト | テラトカルシノーマ |
| PanC1 | ヒト | 膵臓がん |
| PC12 | ラット | 副腎髄質 |
| PC3 | ヒト | 前立腺がん |
| Primary Osteoblast | 初代骨芽細胞 | 初代骨芽細胞 |
| RBL2H3 | ラット | 血球・リンパ球 |
| Sf9 | ヤトウガ | ヤトウガ |
| S2 | ショウジョウバエ | ショウジョウバエ |
| SHSY-5Y | ヒト | 神経芽 |
| T98G | ヒト | 脳グリオブラストーマ |
| U937 | ヒト | 単球性白血球 |
| UtSMC | ヒト | 子宮平滑筋 |
| Vero | アフリカミドリザル | 腎臓 |
| VSMC | ラット | 血管平滑筋 |
| 初代培養細胞 | マウス | 胎児海馬 |
| 初代培養細胞 | 耳下腺腺房細胞 | 耳下腺腺房細胞 |
他社との比較例
■ HilyMAXは汎用されている市販の導入試薬と同等かそれ以上の導入効率
| 細胞名 | HilyMax | I社導入試薬 |
|---|---|---|
| CHO | 90% | 80% |
| HeLa | 70% | 70% |
| HEK293 | 60% | 60% |
| NIH3T3 | 70% | 50% |
| A549 | 50% | 50% |
| L6 | 30% | 20% |
| 3T3-L1 | 30% | 30% |
| K562 | 30% | 3% |
| LNCap | 70% | 30% |
| PC3 | 70% | 45% |
| 細胞名 | HilyMax | I社導入試薬 |
|---|---|---|
| MCF-7 | 70% | 70% |
| Neuro2a | 70% | 70% |
| MG63 | 20% | 17% |
| HC | 50% | 65% |
| COS7 | 40% | 50% |
| HepG2 | 10% | 20% |
| Vero | 40% | 55% |
| MDCK | 20% | 25% |
| Jurkat | 3% | 4% |
| UtSMC | 10% | 15% |
■ 初代培養細胞、血球系細胞での高効率遺伝子導入
初代培養細胞（COV)への遺伝子導入
血球系細胞（DT40）への遺伝子導入
COV(ニワトリ卵巣由来)細胞およびDT40(ニワトリB細胞由来)細胞にpGL3 vectorを血清存在下で遺伝子導入し、24時間後にLuciferase活性を測定した。
(データ提供：就実大学薬学部生物薬学科分子細胞薬学ユニット)
■ 汎用されている細胞へのGFP導入例
CHO cell
HEK293 cell
A549 cell
HeLa cell
NIH3T3 cell
HilyMAXによる遺伝子導入例
使用例は下記リンク(メーカーHP)をご参照ください。
Q＆A
- 遺伝子導入後の培地交換は必ず行う必要はありますか？
- 低い細胞毒性と高い導入効率を望まれる場合は、培地交換をお勧めします。
しかし、細胞(例：CHO細胞など)によっては、培地交換が毒性や導入率に影響しないものもありすので、細胞系にあわせて行ってください。
- 導入効率が悪かった場合、どのような点を検討すれば良いでしょうか？ (DNA量、HilyMax量、複合体形成比、時間など)
-
＜細胞毒性が低い＞
導入効率が極端に低い場合は、DNA量を増やすか、DNA(μg):HilyMax(μL)=1:5～1:9にしてみてください。
高い導入効率を示す場合があります。＜細胞毒性が高い＞
DNA量またはHilyMax量を減らしてください。
- 説明書には、保存条件が『冷蔵』と『冷凍』の2つの記載があります。 どのように保存すればよいのでしょうか？ 最初から『冷凍』したり、ずっと『冷蔵』ではダメですか？
-
未開封・未使用の場合には『冷蔵保存』、試薬を緩衝液と混合し溶解した後は『冷凍保存』してください。
未開封の状態で『冷凍保存』いただいても品質には問題はありませが、使用時に凍結した[Lipoform Buffer]を融解していただく必要があります。また、溶解後に関しては、2～3週間以内に使い切る場合であれば『冷蔵保存』いただいても性能に影響はありません。数週間を越える使用の場合には、必ず『冷凍保存』してください。
参考文献
- S. Mima, H. Ushijima, H.-J. Hwang, S. Tsutsumi, M. Makise, Y. Yamaguchi, T. Tsuchiya, H. Mizushima and T. Mizushima, "Identification of theTP01gene in Yeast, and its Human Orthologue TETRAN, which Cause Resistance to NSAIDs",FEBS Lett.,2007,581, 1457.
- T. Namba, T. Ishihara, K. Tanaka, T. Hoshino and T. Mizushima, "Transcriptional Activation of ATF6 by Endoplasmic Reticulum Stressors",Biochem. Biophys. Res. Commun.,2007,355, 543.
- H. Nakajima, W. Amano, A. Fujita, A. Fukuhara, Y. Azuma, F. Hata, T. Inui and T. Takeuchi, "The Active Site Cysteine of the Proapoptotic Protein Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase Is Essential in Oxidative Stress-induced Aggregation and Cell Death",J. Biol. Chem.,2007,282(36), 26562.
- A. Endo, D. Sumi and Y. Kumagai, "1,2-Naphthoquinone Disrupts the Function of cAMP Response Element-binding Protein through Covalent Modification",Biochem. Biophys. Res. Commun.,2007,36(1), 243.
製品一覧
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- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
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