２つの指標で見えてくる 解糖系とミトコンドリア機能
当サイトは、ご利用されているブラウザでは適切に表示されない場合がございます。
最新のブラウザに更新いただくことを推奨いたします。
特長
- １つのサンプルで「解糖系」と「ミトコンドリア機能」の ２つを測定
- 培養上清は乳酸産生量の測定に
- 細胞はミトコンドリア膜電位の測定に - 2つの指標を併せて測定することで、細胞内の代謝変化が詳しくわかる
「解糖系」と「ミトコンドリア機能
-
なぜ、２つの指標で見るのか？
ミトコンドリア機能障害は、がんや老化、神経変性疾患など様々な疾患に関与していることが知られており、ミトコンドリア膜電位はミトコンドリア活性の指標としてよく測定されてる項目の一つです。
また、ミトコンドリア機能が低下した老化細胞では解糖系を亢進させることや、解糖系に強く依存するがん細胞では解糖系が抑制されてもミトコンドリア機能を活性化させて生存を維持することが報告されており、ミトコンドリア機能と解糖系は密接に関与することが明らかになってきています。
このことから、細胞内代謝変化をより深く理解するために、ミトコンドリア膜電位と解糖系の代謝産物である乳酸産生量を併せて見る必要性が高まっています。
薬剤刺激による細胞内代謝変化 ‐乳酸産生量とミトコンドリア膜電位から見えること‐
薬剤刺激等により、エネルギー産生の主要な経路である解糖系やミトコンドリア機能にダメージを与えたにも関わらず、細胞が生存している場合があります。これは、ミトコンドリア機能を阻害しても解糖系を亢進させることや、解糖系が阻害されてもミトコンドリア機能を活性化することで細胞が生存を維持、細胞死を抑制しようとするためであることが知られています。
例えば、以下のように解糖系とミトコンドリア機能を併せて確認することで「細胞内で何が起きているのか？」が見えてきます。
プロトコル
同一のサンプルから、上清と細胞を分けることで、ミトコンドリア膜電位（JC-1 Assay）と乳酸産生量を測ることができます。
実験例
解糖系阻害剤 2-Deoxy-D-glucose（2-DG）で処理した HeLa 細胞の細胞内代謝変化
2-DG 処理した HeLa 細胞において、CCK-8※アッセイにより細胞生存率を評価したところ、生存率はほとんど変化がありませんでした。
しかし、乳酸産生量の減少が確認されたことから、解糖系が阻害されているにも関わらず生存率が維持されているのは何故なのか、JC-1 Assayによりミトコンドリア膜電位を併せて確認したところ、2-DG 処理した HeLa 細胞ではミトコンドリア膜電位の上昇が見られました。
これらの結果から、HeLa 細胞は 2-DG により解糖系が阻害されても、ミトコンドリア機能を亢進させることで生存を維持しているということが分かりました。
※ Cell Counting Kit-8（メーカーコード：CK04）は別売りです。
製品一覧
- 項目をすべて開く
- 項目をすべて閉じる
- 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
- 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
- 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。
Share