R&D Systems社 CAR-T/CAR-NK 細胞検出用 蛍光標識タンパク質
T細胞またはナチュラルキラー（NK）細胞への形質導入後のキメラ抗原受容体（CAR）の発現評価は、CAR-T細胞またはCAR-NK細胞の製造において重要なステップです。
一次抗体と蛍光標識された二次抗体を使用して間接的にCARを検出するよりも、 CARの発現に蛍光標識タンパク質を使用することで、より特異的に、短時間で、低バックグランドで解析することができます。
特長
- 直接的な検出
蛍光標識タンパク質によるターゲット分子の直接的な検出は非常に特異的であり、一次抗体と蛍光標識二次抗体を用いた間接的な検出によって発生する可能性があるバックグランドのシグナルを排除します。 - 操作時間の短縮
蛍光標識2次抗体が必要なく、検出に必要なステップは１つだけです。 - Alexa Fluor® 蛍光標識
タンパク質はAlexa Fluor®蛍光色素で標識されており、他の類似したスペクトルを持つ蛍光色素よりも強い蛍光と優れた光安定性を提供します。 - 高い生物活性
蛍光標識タンパク質は未標識のタンパク質と同レベルの高い活性を保持していることを確認するために厳密に試験されています。 - 高いロット間の一貫性
新しいロットは、前ロットおよびマスターロットと一緒に試験され、ロット間の高い一貫性を確実なものとしています。
製品一覧
| タンパク質 | 動物種 | 発現細胞 | タグ | 蛍光色素 | コード |
|---|---|---|---|---|---|
| BCMA | Human | NS0 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG193 |
| Alexa Fluor®647 | AFR193 | ||||
| Atto 488 | ATJ193 | ||||
| Atto 647N | ATM193 | ||||
| CD19 | Human | CHO | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG9269 |
| Alexa Fluor®647 | AFR9269 | ||||
| Atto 488 | ATJ9269 | ||||
| Atto 647N | ATM9269 | ||||
| CD30/TNFRSF8 | Human | HEK293 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG11155 |
| Alexa Fluor®647 | AFR11155 | ||||
| CD40/TNFRSF5 | Human | NS0 | Fc, His | Alexa Fluor®488 | AFG1493 |
| Alexa Fluor®647 | AFR1493 | ||||
| CD300e | Human | HEK293 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG10479 |
| Alexa Fluor®647 | AFR10479 | ||||
| EGF R | Human | NS0 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG344 |
| Alexa Fluor®647 | AFR344 | ||||
| EMMPRIN/CD147 | Human | NS0 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG972 |
| Alexa Fluor®647 | AFR972 | ||||
| ErbB2/Her2 | Human | NS0 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG1129 |
| Alexa Fluor®647 | AFR1129 | ||||
| Glypican 3 | Human | NS0 | His | Alexa Fluor®488 | AFG2119 |
| Alexa Fluor®647 | AFR2119 | ||||
| IL-13 R alpha2 | Human | CHO | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG7147 |
| Alexa Fluor®647 | AFR7147 | ||||
| Mesothelin | Human | NS0 | His | Alexa Fluor®488 | AFG3265 |
| Alexa Fluor®647 | AFR3265 | ||||
| MUC-1 | Human | HEK293 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG10332 |
| Alexa Fluor®647 | AFR10332 | ||||
| OX40 | Human | NS0 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG3388 |
| Alexa Fluor®647 | AFR3388 | ||||
| PD-1 | Human | NS0 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG1086 |
| Alexa Fluor®647 | AFR1086 | ||||
| Siglec-2 / CD22 | Human | NS0 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG1968 |
| Alexa Fluor®647 | AFR1968 | ||||
| Atto 488 | ATJ1968 | ||||
| Atto 647N | ATM1968 | ||||
| Siglec-3 / CD33 | Human | NS0 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG1137 |
| Alexa Fluor®647 | AFR1137 | ||||
| Atto 488 | ATJ1137 | ||||
| Atto 647N | ATM1137 | ||||
| TSLPR | Human | NS0 | Fc | Alexa Fluor®488 | AFG981 |
| Alexa Fluor®647 | AFR981 |
※Alexa Fluor® は Thermo Fisher Scientific社の商標または登録商標です。
タンパク質のアミノ酸構造
例）CHO細胞由来のRecombinant Human CD19 Protein, Atto 488 Conjugate (R&D Systems メーカーコード : #ATJ9269-020 ) のアミノ酸構造
-
N末端側にhCD19の21番目グリシンから291番目リシンまでのアミノ酸が配列しています。IEGRMD（リンカーポリペプチド）を挟んでC末端側にヒトIgG1の100番目プロリンから330番目リシンまでのアミノ酸が配列しています。
データ例
Recombinant Human CD19 Protein, Atto 488 Conjugate (R&D Systems メーカーコード : #ATJ9269-020)
-
hCD19遺伝子導入CAR-T細胞のフローサイトメトリー結果
hCD19 CAR遺伝子を導入後11日間培養したCD4+,CD8+T細胞をRecombinant Human CD19 Protein, Atto 488 Conjugate (R&D Systems メーカーコード : #ATJ9269-020)とCD4抗体で染色し、フローサイトメーターで解析した結果。hCD19 CAR遺伝子を導入したT細胞では、Recombinant Human CD19 Protein, Atto 488 Conjugateの蛍光が確認できた。A：hCD19 CAR遺伝子を導入したT-細胞
B：hCD19 CAR遺伝子を導入していないT-細胞
Recombinant Human BCMA/TNFRSF17 Protein, Atto 647N Conjugate (メーカーコード : #ATM193)
-
hBCMA遺伝子導入CAR-T細胞のフローサイトメトリー結果
hBCMA TNFRSF17 CAR遺伝子を導入したT細胞を抗BMCA抗体を表面に結合させた蛍光ビーズとRecombinant Human BCMA/TNFRSF17 Protein, Atto 647N Conjugate (R&D Systems メーカーコード : #ATM193)で染色し、フローサイトメーターで解析した結果。hBCMA CAR遺伝子を導入したT細胞では、Recombinant Human BCMA/TNFRSF17 Protein, Atto 647N Conjugateの蛍光が確認できた。A：hBCMA CAR遺伝子を導入したT-細胞
B：hBCMA CAR遺伝子を導入していないT-細胞
(上図）ロット間の一貫性と未標識タンパク質との生理活性の比較
APRIL/TNFSF13(メーカーコード：#5860-AP)を0.1µg/mLの濃度でそれぞれのウェルに固定化した。その後、それぞれのウェルにBCMA Fc Chimera Atto 647N（メーカーコード：#ATM193）の異なる3つのロット（赤、緑、オレンジの線）と蛍光未標識のBCMA Fc Chimera(メーカーコード：#193-BC）（青い線）を加えた。3つのロット（赤、緑、オレンジの線）のBCMA Fc Chimera Atto 647N（メーカーコード：#ATM193）で活性に差異が見られなかった。また、蛍光標識タンパク質は未標識のタンパク質と同等の生理活性を有している事が確認できた。
製品一覧
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Recombinant Human CD19 Chimera
Recombinant Human BMCA/TNFRSF17 Chimera
Recombinant Human Siglec-2/CD22 Chimera
Recombinant Human Siglec-3/CD33 Chimera
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