SOFORO Cryo

1. サラヤ社の独自原料であるソホロースリピッド配合の細胞用凍結保存液
2. 細胞の性質に影響がなく、凍結保存が可能
3. DMSOや動物由来の成分を一切含まない
4. 培養培地と1:1で混合するだけで凍結保存が可能
5. 細胞毒性が低く、解凍後除去せずにそのまま培養可能

ソホロースリピッドの氷晶形成抑制効果

走査型プローブ顕微鏡 (AFM5000/AFM5300、日立ハイテクサイエンス製) の冷却ステージにて試験試料を凍結させ、光学顕微鏡で観察しました。
＊大阪大学ナノテクノロジー設備共用拠点の支援で実施。

ソホロースリピッドの細胞毒性評価

ヒト脂肪組織由来間葉系幹細胞を96 well プレートで培養し、各界面活性剤を混合させた培地を添加しました。48 時間培養後にMTT アッセイを行い、細胞生存率を算出しました。
他の界面活性剤と比較して、ソホロースリピッドの細胞毒性が低いことが確認されました。

凍結保存後細胞の接着効率

ヒト脂肪組織由来間葉系幹細胞を-80℃で凍結融解後に細胞を播種し、16時間後に接着効率を確認しました。
SOFORO CryoはDMSOフリーの凍結保存液の中で高い接着効率を示しました。

凍結保存後細胞の分化能

SOFORO Cryo によって凍結保存したヒト脂肪組織由来間葉系幹細胞について、脂肪細胞および骨芽細胞へ分化させた場合の影響を評価しました。脂肪細胞はオイルレッド染色、骨芽細胞はアリザリンレッドで染色し、顕微鏡での観察、吸光度による定量評価した結果を示します。SOFORO Cryo によって幹細胞を凍結保存しても分化能に影響がないことが確認されました。

スフェロイドの凍結保存効果

低吸着U 底96 ウェルプレートを用いて、ヒト脂肪組織由来間葉系幹細胞 1×10⁵ 個のスフェロイド（細胞凝集塊）を作製し、SOFORO Cryo によって凍結保存が可能か評価しました。細胞生存率は凍結融解後のスフェロイドを酵素処理し、シングルセルの状態のものをトリパンブルー染色にて計測を行いました。その結果を以下に示します。スフェロイドは高い生存率を示し、SOFORO Cryo でスフェロイドの凍結保存が可能であることが確認されました。

また、凍結融解後のスフェロイドの凍結切片を作製し、蛍光観察を行いました。その結果を下図 に示します。融解後のスフェロイドの構造が維持されているのが確認されました。

• ✔　ヒト間葉系幹細胞（骨髄由来）
  ✔　ヒト間葉系幹細胞（脂肪組織由来）
  ✔　ヒトiPS細胞（253G株など）
  ✔　CHO：チャイニーズハムスター卵巣細胞
  ✔　SIRC：ウサギ角膜上皮細胞
  ✔　TIG：ヒト肺由来付着性細胞
  ✔　HeLa細胞
• ✔　G361：ヒトメラノーマ細胞
  ✔　B16：マウスメラノーマ細胞
  ✔　NHDF：正常ヒト皮膚線維芽細胞
  ✔　HEK293：ヒト胎児腎細胞
  ✔　HUVEC：ヒト臍帯静脈内皮細胞
  ✔　HuH7：ヒト肝臓がん由来細胞
  ✔　Hep-G2：ヒト肝臓がん由来細胞

お試し用のサンプル（30 mL）をご用意しております。
サンプルをご希望の方は、下記WEBフォームからご応募ください。アンケートにもご協力お願いいたします。