iCell^® DDP(パーキンソン病モデル）

	iCell DopaNeurons SNCA A53T HZ-01279	iCell DopaNeurons LRRK2 G2019S -11299	iCell DopaNeurons GBA N370S -11344
性別	男性	男性	男性
年齢層	50-59歳	50-59歳	60-69歳
民族性	Caucasian	Caucasian	Caucasian
組織起源	PBMC	PBMC	PBMC
遺伝子変異	SNCA (A53T)	LRRK2 (G2019S)	GBA (N370S)
リプログラミング法	エピソーマルベクター	エピソーマルベクター	エピソーマルベクター
病態モデル作製法	Genetic Engineering	Innate	Innate

SNCA 遺伝子の A53T 変異は、パーキンソン病 (PD) に関連する遺伝子変異のうち PD 発症率が高くまた広く研究されている遺伝子変異です。SNCA 遺伝子は、主に脳のシナプス前終末で発現する α-シヌクレイン (α-syn) タンパク質をエンコードし、その A53T 変異は、α-syn を PD 病理の特徴的な指標である凝集体の形成と蓄積を引き起こします。

健常人iPS細胞由来ドーパミン神経細胞である iCell^® DopaNeurons と同じ遺伝背景を持った01279 iPS 細胞株の SNCA 遺伝子に A53T ヘテロ変異を導入後、ドーパミン神経細胞に分化した iCell^® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279を作製しました。

qPCR 法により iCell^® DopaNeurons に対し、iCell^® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279 の TH (tyrosine hydroxylase) および DDC (dopa decarboxylase) 遺伝子発現の減少と COMT (catechol-O-methyltransferase) の遺伝子発現の増加が明らかになり、iCell^® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279 における DA (dopamine) の生合成レベルの低下が示唆されます。

iCell^® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279における、α-シヌクレイン 陽性シグナルは iCell^® DopaNeurons よりも強く認められます。

XFミトストレステストによるミトコンドリア機能評価

WT (iCell^® DopaNeurons) および A53T (iCell^® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279) 細胞の生体エネルギー分析の比較において、酸化的リン酸化脱共役剤である FCCP (carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)phenylhydrazoneと最大呼吸能力への応答が A53T 変異細胞で大きいことを示しています。

MEAによる計測

MEA (multi electrode array) において、iCell^® DopaNeurons および iCell^® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279 の両細胞は、活発な自発発火と同期バーストを示します。 iCell^® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279 細胞では、同期バーストの頻度が少なくなりますが、バーストの強度は約5倍大きくなります。

自発 Ca オシレーションの比較

培養の初期 (7日目) の A53T (iCell^® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279) 細胞における自発 Ca オシレーション波形は、iCell^® DopaNeurons とは大きく異なる振幅と頻度を示します。

GBA N370S および LRRK2 G2019S について

Glucosylceramidase (GBA）遺伝子変異はパーキンソン病の強いリスク因子であり、なかでも、GBA N370S 変異はメジャーな変異であることが知られています。GBA 活性とアルファシヌクレイン蓄積量に負の相関が認められます。Leucine rich-repeat kinase 2 （LRRK2) 遺伝子変異は家族性パーキンソン病の責任遺伝子において最も高頻度で認められ、LRRK2 G2019S 変異のパーキンソン病患者脳において、リン酸化タウによる病変が報告されています。

これらの変異を持ったパーキンソン病患者由来 iPS 細胞から、iCell^® ドーパミン神経細胞 (GBA N370S) -11344 および (LRRK2 G2019S) -11299 を作製しました。

iCell^® ドーパミン神経細胞 (GBA N370S) -11344 および (LRRK2 G2019S) -11299 の細胞性状

コントロールの健常者 iPS 細胞由来ドーパミン神経細胞と比較して、 iCell^® ドーパミン神経細胞 (GBA N370S) -11344、(LRRK2 G2019S) -11299 および (SCNA A53T) -01279 は、 GBA 活性の低下 (A)、α-シヌクレインタンパク質の蓄積の増加 (B)、および電気生理学的アクテビティの減少 (C) を示した。

• iCell^®ドーパミン神経細胞
  (SNCA A53T) -01279

  

  
  

  

  
  

  

• iCell^® 神経用基礎培地

  

• iCell^® 神経用サプリメント B

  

• iCell^® 神経系サプリメント

  

製品コード	メーカーコード	品名	容量	コントロール細胞 上段：製品コード 下段：メーカーコード
iCell® DopaNeurons (SNCA A53T) 01279 株
553-34791	C1112	iCell® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279 1M Cells 1M iCell® ドーパミン神経細胞 (SNCA A53T) -01279	≥1.0 x 106 cells/vial	551-33511 C1087
556-34801	C1113	iCell® DopaNeurons SNCA A53T HZ, 01279 5M Cells 5M iCell® ドーパミン神経細胞 (SNCA A53T) -01279	≥5.0 x 106 cells/vial	551-33371 C1028
iCell® DopaNeurons (GBA N370S) 11344 株
559-41981	C1147	iCell® DopaNeurons (GBA N370S) 11344 1M Cells 1M iCell® ドーパミン神経細胞 (GBA N370S) -11344	≥1.0 x 106 cells/vial	551-33511 C1087
556-41991	C1148	iCell® DopaNeurons (GBA N370S) 11344 5M Cells 5M iCell® ドーパミン神経細胞 (GBA N370S) -11344	≥5.0 x 106 cells/vial	551-33371 C1028
iCell® DopaNeurons (LRRK2 G2019S) 11299 株
553-42001	C1149	iCell® DopaNeurons (LRRK2 G2019S) 11299 1M Cells 1M iCell® ドーパミン神経細胞 (LRRK2 G2019S) -11299	≥1.0 x 106 cells/vial	551-33511 C1087
550-42011	C1150	iCell® DopaNeurons (LRRK2 G2019S) 11299 5M Cells 5M iCell® ドーパミン神経細胞 (LRRK2 G2019S) -11299	≥5.0 x 106 cells/vial	551-33371 C1028
550-33601	M1010	iCell® Neural Base Medium 1 100mL iCell® 神経用基礎培地	100 mL	－
551-33631	M1029	iCell® Neural Supplement B 2mL iCell® 神経用サプリメント B	2 mL	－
558-33641	M1031	iCell® Nervous System Supplement 1mL iCell® 神経系サプリメント	1 mL	－

培地およびサプリメントはコントロール細胞と共通です。

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・iCell^® ドーパミン神経細胞 (SNCA A53T)

1. Nasia Antoniou., et al.:npj Parkinsons Dis. 8, 15 (2022)
   High content screening and proteomic analysis identify a kinase inhibitor that rescues pathological phenotypes in a patient-derived model of Parkinson’s disease