レビス® Human IFN-γ ELISA Kit LBIS Human IFN-γ ELISA Kit

IFN-γはIFN-α/βなどのⅠ型インターフェロンとは構造が異なるⅡ型インターフェロンで、143アミノ酸(ヒト)からなるサイトカインです。IFN-γは主にT細胞、NK細胞により分泌され、ホモ二量体として機能し、抗ウイルス効果をはじめ、細胞増殖抑制効果、抗腫瘍効果、マクロファージ活性化、NK細胞の活性増強、免疫応答調節作用、分化誘導の調節作用などの生物活性を有することが知られており、様々な研究分野で注目されています。

本製品はヒトIFN-γを定量的に測定するためのサンドイッチ酵素免疫測定法です。ヒト血清(血漿)中のIFN-γを特異的かつ高感度に測定することができます。

• カルタヘナ法非該当(バキュロウイルス不含)
• 短時間(総反応時間2時間20分)
• 高感度測定(0.768 pg/mL～)
• 微量検体(～100 μL)

製品情報

検体

• ヒト血清
• ヒト血漿(EDTA/ヘパリン)
• 培養上清

標準曲線範囲

0.768 pg/mL～75.0 pg/mL

操作法・標準曲線(例)

• 操作法

  抗体固相化96ウェルプレート
  ↓
  洗浄 4 回
  ↓
  ビオチン結合抗IFN-γ抗体	50 µL
  ↓
  攪拌
  ↓
  検体 (希釈検体) または標準溶液	100 µL
  ↓
  室温、90分間静置反応、攪拌
  ↓
  洗浄 4 回
  ↓
  ペルオキシダーゼ・アビジン結合物	100 µL
  ↓
  攪拌、室温、30 分間静置反応
  ↓
  洗浄 4 回
  ↓
  発色液(TMB)	100 µL
  ↓
  攪拌、室温、20 分間静置反応
  ↓
  反応停止液(1M H2SO4)	100 µL
  ↓
  攪拌
  ↓
  吸光度測定(主波長450 nm、副波長620 nm)

  室温：20～25 ℃

• 標準曲線(例)

  

データ

• 精度試験(アッセイ内変動)

  正常血清に異なる濃度のIFN-γを添加した2検体を5重測定

  n / ID	Sample1 (pg/mL)	Sample2 (pg/mL)
  1	26.1	1.41
  2	26.4	1.42
  3	26.2	1.44
  4	26.3	1.46
  5	26.4	1.43
  mean	26.3	1.43
  SD	0.13	0.019
  CV(%)	0.50	1.3

  平均C.V.値は15 %未満

• 再現性試験(アッセイ間変動)

  正常血清に異なる濃度のIFN-γを添加した3検体を4日間3重測定

  Day / ID	Sample1 (pg/mL)	Sample2 (pg/mL)	Sample3 (pg/mL)
  0日目	29.1	4.90	0.742
  1日目	29.9	4.69	0.723
  2日目	31.2	4.87	0.785
  3日目	29.5	4.99	0.772
  mean	29.9	4.86	0.756
  SD	0.92	0.13	0.028
  CV(%)	3.1	2.6	3.7

  平均C.V.値は15 %未満

添加回収試験(正常血清または血漿検体に異なる3濃度のIFN-γを添加し測定)　回収率は86.8～108 %

• 血清検体

  添加量 (pg/mL)	実測値 (pg/mL	回収量 (pg/mL)	回収率 (pg/mL
  －	0.516	－	－
  1.00	1.60	1.08	108
  4.00	4.50	3.98	99.5
  16.0	16.4	15.9	99.4

• 血漿検体(ヘパリン)

  添加量 (pg/mL)	実測値 (pg/mL	回収量 (pg/mL)	回収率 (pg/mL
  －	0.618	－	－
  1.00	1.62	1.00	100
  4.00	4.20	3.58	89.6
  16.0	14.5	13.9	86.8