Cloudz Human NK Cell Expansion Kit Cloudz Human NK Cell Expansion Kit

本製品は、K562フィーダー細胞フリー条件下で、peripheral blood mononuclear cells (PBMCs)からNK細胞を増殖させるキットです。CD2抗体、NKp62抗体が結合している溶解可能なマイクロビーズと、マイクロビーズを溶解させるバッファーがセットとなっています。マイクロビーズがすぐに溶解するため、細胞の回収が簡単です。おおよそ10日間でPBMCsからNK細胞を100倍に増殖させることができます。

特長

• 10日間でPBMCsからNK細胞が100倍に増殖
• CD2/NKp46抗体が結合したマイクロビーズを溶解可能
• 磁気ビーズを不使用

キット構成

• Cloudz CD2/NKp46^※1・・・9 mL
• Cloudz 6x Release Buffer^※2・・・100 mL

• 1：CD2抗体/NKp46抗体が結合したマイクロビーズ
• 2：マイクロビーズを溶解させるバッファー

その他必要な試薬・機器

• Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs)
• T-25 フラスコ
• Recombinant Human IL-2 (R&D Systems, 製造元コード：202-IL or 202-GMP)
• Recombinant Human IL-12 (R&D Systems, 製造元コード： 219-IL)
• Recombinant Human IL-18 (R&D Systems, 製造元コード：9124-IL)
• Recombinant Human IL-21 (R&D Systems, 製造元コード：8879-IL)
• Fetal Bovine Serum
• Base medium（CellGenix SCGM Media 製造元コード：20802-0500　または同等品）
• 1x PBS
• 顕微鏡
• セルカウンター
• CO₂インキュベーター
• ピペットおよびチップ

• ■ Cloudz NK Cell Expansion Kit を用いたNK細胞の増殖と増殖後の純度

  

  本製品を用いて、in vitro 10日間 human PBMCsを増殖させた。(A)細胞培養6、7、9、10日目 の増殖率を評価。10日目の増殖NK細胞はほぼ300倍となった。 (B)細胞集団を評価。CD3^-CD56⁺NK細胞が全体の94.4%を占めた。

• ■ 増殖したHuman NK細胞のフローサイトメトリー解析

  

  Cloudz NK Cell Expansion Kit を用いて、in vitro にて10日間PBMCを培養。増殖10日目にNK細胞を回収し、human NCAM-1/CD56抗体とHuman CD3抗体を用いて染色し、フローサイトメトリーにて解析した。(A) 未増殖のPBMCs細胞。(B) Cloudz NK Cell Expansion Kit を用いて、PBMCsを増殖。(A)と比較し、(B)においてCD3⁺CD56⁺NK細胞が増えたことが分かる。