Cloudz Human T Cell Activation Kit

R&D systems社 T細胞増殖試薬 (Cloudz Human T Cell Activation Kit)

Cloudz Immune Cell Activation Kitsシリーズは、T細胞、Regulatory T細胞およびNK細胞のex vivoの拡大培養を最新鋭化します。簡便に溶解可能な次世代のポリマー非磁性粒子である Cloudz 粒子を用いることにより細胞活性化試薬の除去を容易にすることができます。これにより抗体ベースの免疫細胞の活性化を改善し、現在の「磁気ビーズベース」の細胞活性化方法よりも安全で有効的な方法可能にしました。
本製品は、T細胞を増殖させるキットです。本製品はT細胞に発現しているCD3/CD28に対する抗体が結合しているマイクロビーズであるCloudzとCloudzを溶解するバッファーが含まれます。10日間の培養でT細胞を約50倍以上に増殖可能です。増殖後は溶解バッファーによってビーズを簡便に溶解できます。

特長

磁気ビーズフリー
次世代の非磁気性ポリマーマイクロビーズCloudzを使用しています。

細胞回収の簡略化
磁気性ビーズと比べて、T細胞増殖後の除去が容易です。

高い増殖効率
Cloudz CD3/CD28を添加して10日にはT細胞数が約50倍以上に増殖します。

簡易プロトコール

  1. PMBCsまたはCD3+T細胞を用意して細胞数を数えます。
  2. IL-12を含むExCellerate™ T Cell Expansion Media (R&D Systems, #CCM030) に1.の細胞を懸濁して培養容器に移します。
  3. Cloudz CD3/CD28を培養容器に加え、優しく混和させます。
  4. 加湿インキュベーター(37℃, 5%CO2)で9日間培養します。
  5. 培養後、溶解バッファーを加えます。
  6. 遠心分離でT細胞を回収します。

データ

T細胞の増殖

1.T細胞数の変化

Cloudz CD3/CD28を含むExCellerate™ T Cell Expansion Media (R&D Systems, #CCM030)で培養したCD3+T細胞数の変化を時間経過で測定しています。Day 0 の細胞数は0.25×106 (細胞数/mL)です。

2.フローサイトメトリー


CD3+T細胞をExCellerate™ T Cell Expansion Media (R&D Systems, #CCM030)で48時間培養後の フローサイトメトリーの結果です。
CD69*-a488(R&D Systems, #FAB23591G)とCD25*-PE (R&D Systems, #FAB1020P)を標識しています。
A. Cloudz CD3/CD28を含む培地
B. Cloudz を含まない培地

*T細胞の表面で発現しているタンパク質です。

キット内容

1) Cloudz CD3/CD28(#SPC-4263) 12 mL
  CD3/CD28抗体が結合したマイクロビーズ

2) 6X Release Buffer(#SPC-4262) 100 mL
  Cloudzの溶解バッファー

1)と2)には、2×108個のCD3+T細胞の活性化に十分な試薬が含まれています。

▼キット以外で必要な試薬

  • PBMCs もしくは 末梢血またはフュレーシスから得られたCD3+T細胞(新鮮、もしくは凍結された細胞が望ましい)
  • ExCellerate Human T Cell Expansion Media (R&D Systems, #CCM030)
  • Recombinant Human IL-2 Protein (R&D Systems, #202-ILもしくは#202-GMP)
  • 培養容器(プレート、フラスコ、培養バッグ、G-Rexなど)
  • 滅菌1×PBS
  • セルカウンター

製品一覧

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関連製品一覧

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  • 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
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