MALBAC Single Cell WGA Kit

MALBAC Single Cell WGA Kitは、シングルセルや、ピコグラム~ナノグラムレベルのgDNAの全ゲノム増幅を行います。
迅速で信頼性の高い、再現性のとれた増殖産物が約4時間で2~4 µg得られます。また、本キットはinput DNAが少ない場合にも使用可能です。

Multiple Annealing and Looping Based Amplification Cycles(MALBAC)とは

MALBACは指数関数的な増幅を行う従来のPCR法とは異なる全ゲノムDNA増幅法です。

MAKBACプライマーと独自の酵素により、鋳型ゲノムDNAにランダムにプライマーがアニーリングし、セミアンプリコンが生成されます。セミアンプリコンがさらに増幅される際、末端にプライマーと相補的な配列をもつ完全アンプリコンが生成され、この末端配列によりアンプリコンはループを形成します。これは次の増幅反応の鋳型にはなりません。

生成物はRT-PCRやマイクロアレイ、次世代シークエンスなどのアプリケーションに適用できます。

  • ループ型をとっているため次のDNA合成反応の鋳型にならない
    ⇒準線形型の増幅が可能に!! (通常のPCRは指数関数的な増幅)

特長

  • 最少の増殖バイアスと最少のアレルドロップアウト率を伴った準線形増殖
  • 簡便な実験プロセス (1チューブ、3ステップ、4時間)
  • 高い増殖成功率 (95%以上)
  • ATリッチ領域及びGCリッチ領域の両方で、再現性のある遺伝子座表示と一貫した増幅効率を実現
  • 高いゲノムカバー率 (<10% 遺伝子座ドロップアウト)

操作概要

キット内容

  • キット内容 10回用 50回用
    Cell Lysis Buffer 100 μL 300 μL
    Cell Lysis Enzyme 10 μL 30 μL
    Pre-Amp Buffer 300 μL 750 μL x 2
    Pre-Amp Enzyme Mix 10 μL 50 μL
    Amp Buffer 300 μL 750 μL x 2
    Amp Enzyme Mix 8 μL 40 μL
  • 本キットの使用には下記も必要です (キットには含まれません)

    PCR thermal cycler Micro Centrifuge
    PCR tubes PBS buffer
    Dedicated pipette set Vortex
    Filter pipette tips Spectrophotometer
    Nuclease-free-water

アプリケーション

最適な増殖サイクルにおいて、MALBAC Single Cell 全ゲノム増殖反応を行いました。単一の哺乳類細胞や同等の高品質なゲノムDNA 65 μLをサンプルとし反応させると、300-2,000bpに分布する2-4 μgの増殖DNAを生成します。

M:マーカー
Lane 1:ネガティブコントロール
Lane 2:ポジティブコントロール (30 pg ヒトgDNA)
Lane 3, 4 :Single Cell WGA product

用途

MALBAC Single Cell WGA Kitによる生成物は、様々な用途に使用可能です。

  • アプリケーション例

    • サンガーシークエンス (点変異検出)
    • 一塩基多型(SNP)アレイ
    • SNP遺伝子型判定
    • 次世代シークエンス
    • リアルタイム qPCR
    • 分子クローニング
    • アレイCGH
  • 適用分野例

    • バイオマーカー探索 (CNVs、SNVs)
    • 着床前スクリーニング(PGS)、着床前診断(PGD)
    • 遺伝子組み換え動物のジェノタイピング
    • がん幹細胞
    • 病原体解析

    etc.

対象サンプル

MALBAC Single Cell WGA Kitでは様々なサンプルに適応しています。

サンプル例

  • ゲノムDNA
  • 培養細胞
  • 血液(新鮮血/乾燥血液)
  • 組織(凍結組織も含む)
  • 精子
  • 精液
  • 卵母細胞
  • 極体(卵子)
  • サンプル量:0.5 pgまたは単一染色体~1 ngゲノムDNAまで幅広く適応

製品一覧

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  • 掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
  • 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
  • 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。