SYBR® Green Ⅰ 検出系 (インターカレーター法) リアルタイム定量PCR試薬

ニッポンジーン GeneAce SYBR® qPCR Mix α

GeneAce SYBR® qPCR Mix αシリーズは、リアルタイムPCR用サーマルサイクラー(プレートタイプ)に対応したSYBR® Green検出系のリアルタイムPCR用マスターミックス(2x濃度)です。
試薬が小分け分注されており、操作性に優れています。化学的な修飾を施されたホットスタートPCR用の耐熱性ポリメラーゼ「Hot-Start GeneTaq NT」と最適化されたバッファーにより、非特異的増幅を抑制し、広範囲の鋳型濃度に対し精度の高い分析ができます。

特長

  • 非特異的増幅を抑え、高い特異性と高感度のPCRを実現
  • 幅広い増幅鎖長(600 bp以下)に対するPCR増幅効率が向上
  • ホットスタートPCR用酵素の採用により、特異性の高いPCRが可能
  • プレミックスタイプの試薬が小分け分注済みで操作が簡便

実験例

2種類のReal time PCR装置(ABI Prism® 7500, LightCycler® 96)にて、プラスミドpUC19 DNAを鋳型とし、本製品の推奨PCR サイクル条件にて増幅鎖長120 bpのリアルタイムPCRを行い、他社製品と増幅効率を比較した。
また、融解曲線を描いて非特異的産物の有無を確認した。

実験例1 ABI Prism® 7500を用いた増幅試験

Template
定量PCR 試薬
PCR volume
サンプル数
装置
Run mode
PCR condition
:pUC19 DNA(NTC, 1 fg, 10 fg, 100 fg)
:GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX
:25 μL
:n=3
:ABI Prism® 7500
:9600 emulation mode
:95°C 10分→(95°C 30秒→60°C 60秒) x 45サイクル

実験例2 LightCycler® 96を用いた増幅試験

Template
定量PCR 試薬
PCR volume
サンプル数
装置
Ramp rate
PCR condition
:プラスミドpUC19 DNA(NTC, 0.1fg, 1fg, 10fg, 100fg, 1pg)
:GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX
:25 μL
:n=3
:LightCycler® 96
:4.4°C/sec.
:95°C 10分→(95°C 30秒→60°C 60秒) x 45サイクル

GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROXは、鋳型DNA量が少ない場合でもバラツキが少なく、安定した低いCt値を示した。また、融解曲線解析では、それぞれの鋳型DNA量の増幅産物で、同じTm値の1本のピークが得られ、他社製品と比較し高い特異性が示された。
本製品は、非特異的増幅を抑え、高い特異性と高感度のPCRが可能であることが示された。

対応機種一覧

GeneAce SYBR® qPCR Mix α

構成品 300反応用 60反応用 形状
2 x GeneAce SYBR® qPCR Mix α 1.5 mL x 5本 1.5 mL x 1本 Hot-Start GeneTaq NT, ROX Passive Reference, Mg2+, dNTP Mixture,
SYBR® Green Ⅰ, stabilizers
対象機種: ABI GeneAmp® 5700, ABI Prism® 7000/7700/7900, ABI7300, StepOne™ /StepOnePlus™ , MasterCycler® ep realplex

GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX

構成品 300反応用 60反応用 形状
2 x GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX 1.5 mL x 5本 1.5 mL x 1本 Hot-Start GeneTaq NT, ROX Passive Reference(low conc.), Mg2+, dNTP Mixture,
SYBR® Green Ⅰ, stabilizers
対象機種:ABI Prism® 7500, Mx3000P/3005/4000, QuantStudio 3, 5, 7

GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX

構成品 300反応用 60反応用 形状
2 x GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROX 1.5 mL x 5本 1.5 mL x 1本 Hot-Start GeneTaq NT, Mg2+, dNTP Mixture, SYBR® Green Ⅰ, stabilizers
対象機種:LightCycler® 96/480/Nano, Rotor-Gene® 2000/3000/6000/Q, Thermal Cycler Dice®, Smart Cycler® I/II, CFX96 Touch™, iCycler iQ®, iQ5, MyiQ®,
     DNA Engine Opticon® 1/2, Chromo4, Mini Opticon®, Quantica®

注意事項

本製品は、化学修飾を施したホットスタートPCR酵素を採用しているため、酵素の活性化ステップ(95°C 10分)をPCR条件通り行わないと十分な酵素活性が得られず増幅効率が低下します。
本製品は、リアルタイムPCR用サーマルサイクラーでのランモード「Fast」の標準プロトコル(95°C 20秒 → (95°C 3秒 → 60°C 30秒) x サイクル)には対応しておりません。
本製品には、dUTPは含まれていないため、Uracil-N-Glycosylaseによるキャリーオーバー防止処理はできません。
SYBR® は、Life Technologies社の商標です。

製品一覧

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High ROX タイプ

Lox ROX タイプ

No ROX タイプ

関連製品一覧

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リアルタイム定量PCR (蛍光標識プローブ検出系)

リアルタイム定量PCR (インターカレーター法, UNG付き)

ROX Passive Reference

逆転写酵素

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  • 掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
  • 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
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